4卵黄囊
5脑内
6静脉
很多哺乳类病毒不在鸡胚上生长(不适应)→牢记!!实验需掌握
鸡胚培养病毒的优点和缺点
优点:经济、简便、鸡胚易得
缺点:
1有些鸡胚带有母源抗体
2也可能带有病毒
3很多病毒在鸡胚中不生长
223细胞培养:
1将离体活组织块或分流的活细胞加以培养统称为组织培养,后者又称单层细胞培养。
2细胞培养适于绝大多数病毒生长,是病毒实验室的常规技术。
细胞培养的特点:
(1)细胞的生理特性基本一致
(2)对病毒的感染性一致
(3)没有实验动物的个体差异
(4)重复性好
(5)与实验动物相比,通过观察细胞病变或结合免疫学技术检测判断结果。
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(6)可通过病毒细胞培养产生的空斑进行克隆纯化病毒。
细胞培养的类型
根据细胞的来源、染色体特征及传代次数,可分为三种类型:
(1)原代细胞
(2)二倍体细胞株
(3)传代细胞系
原代细胞:
1动物新鲜离体组织块(剪成小块)经胰蛋白酶消化、分散,获得单个细胞,再生长与培养器皿中。
2有人把培养的第1代细胞与传1o代以内细胞统称为原代细胞。
3分离病毒最为敏感,尤其是本动物的原代细胞。
二倍体细胞株:
1将长成的单层原代细胞消化分散成单个细胞继续培养传代,其染色体数与原代细胞一样保持其二倍体型的染色体,称为二倍体细胞。
2如:猪肾细胞系(pk-15)、犬肾细胞系dck。
3可传至一百代左右
4用于病毒分离和疫苗制备
传代细胞系:
1能在体外持续增殖传代的细胞系,大多数由癌细胞或二倍体细胞突变而来
2方便易得
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