保存试管苗种质关键是要维持最低的生长度,生长度取决于培养温度、培养基组成和品种特性
(1)增加培养基渗透压
(2)降低保存温度:温度是试管苗保存的关键因素,在低温(3~5c)条件下,试管苗中各种酶活性降低,因而减缓了代谢过程和生长度。如果增加培养基渗透压与降低温度相结合,试管苗继代培养间隔时间为2~3年
(3)利用植物生长抑制
(4)补充光照
目前,作为保存种质资源的细胞或组织培养物有:愈伤组织、悬浮细胞、幼芽生长点、花药、花粉、体细胞、原生质体、幼胚等。
从植物中抽取大分子量dna,用限制性核酸内切酶把所抽取的dna切成许多片段,再通过一系列的复杂步骤,把这些dna连接在载体上,通过载体将dna片段转移到大肠杆菌中去,通过大肠杆菌的无性繁殖,产生大量单拷贝的基因,当需要某个基因时,就可通过某种方法去“钩取”获得。
2、植物dna库的保存对象与运作
(1)保存对象:种子植物和非种子植物的种质资源均可采用dna库保存。
种子植物主要保存以下几类基因材料:a难于搜集到的材料,b虽然搜集到种子,但难以繁殖更新的材料,c不能检测种子活力的材料,d顽拗型种子植物,e珍稀濒危植物,f核心样品材料,g基因工程的中间材料。
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非种子植物主要包括藻类、苔藓类和蕨类等,这些植物绝大部分处于野生状态,而且包含着十分丰富的遗传多样性,急需得到保护。
(2)植物dna库的运作:第一步:制定计划,进行植物样本的采集,并制作蜡叶标本,记录原始标记。第二步:妥善保存所搜集的材料,根据需要和条件提取并保存基因组dna,克隆重要的基因,建立dna或a库。第三步:根据用户的需要,在用户提供引物的基础上,钩取基因,并用pa,放给用户。
,(2)分组:将具有相似性状的样品归为一类,逐级分类,没有资料的样品单独分组。
(3)选择:即确定每组选择的数量和对象
(4)建立核心样本(库):对选择出来的核心样品进行鉴定,确保它们是来自不同组的代表,繁殖核心样品,建立该种作物核心种质库。
建成的核心种质库需不断完善、更新
4、展核心种质应注意的几个问题
(1)核心种质不能替代整个种质搜集品。
(2)核心种质的构建需要多学科的交叉知识。
(3)核心种质的构建还没有一套成型的理论。
5、核心种质构建的现状:
目前全球已对5o多种作物进行了相关研究,其中野生大豆、花生、苜蓿等3o多种植物已经或正在建立核心种质。我国对大豆、栽培稻立项
生物学特性的鉴定方法主要分两种
1、自然环境鉴定
二、生物学特性鉴定
1、自然环境鉴定
(1)区域鉴定:利用不同地区的地理条件、土壤条件以及温度、光照、雨量等气候因素的差异,栽培植物种质材料,观察其生育状况,以鉴别种质材料在不同地区的适应性,以及不同品种、变种和种间生物学特性的差别。
(2)季节鉴定:鉴定种质材料对季节的适应性。如分春秋两季栽培,鉴定种质对不同季节的适应性。
同一种作物,有的品种适宜春季栽培,有的适宜秋季栽培。
鉴别种质材料的季节适应性,才能进行合理利用,充分挥其生产潜力。
2、人工控制环境下的鉴定
在大棚、温室、人工气候室或人工气候箱中,通过人工控制环境条件,即人工促成类似季节变化的小气候变化,栽培植物种质材料,鉴别种质材料对单个因子或复合环境因子的最适范围,以及所能忍耐的极限。
人工控制环境的鉴定优点:
人工控制环境条件,各环境因子完全在人工控制下生,可以比较准确的鉴定植物不同种、类型及品种间对春化温度的感应和所需时间的差异,对光强和光周期的适应性。
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